应用案例(质量光度计MP):质量光度计测量蛋白质的变性
质量光度计量化了溶液中生物分子的质量分布。在自然条件下,已确定其用于分析生物样品的纯度、完整性和功能。然而,其在变性条件下的性能尚未得到彻底评估。在本申请说明中,我们证明质量光度计是研究低聚物蛋白质变性(去折叠)和复性(再折叠)的有用工具。通过化学变性破坏蛋白质的天然结构可以深入了解蛋白质和复合物的结构和稳定性。尿素和盐酸胍(GdnHCI)等化学变性剂通过改变蛋白质疏水残基暴露于周围水溶液中,促进蛋白质的变性(去折叠)。虽然化学变性在生物化学研究中已经用了几十年,但由于其涉及大量分析技术,操作成本高,灵敏度低,数据分析和解释太复杂,因此对变性(去折叠)和复性(再折叠)的监测仍然具有挑战性。在本应用说明中,我们探讨了质量光度计(MP)的功能,以快速获得有关蛋白质去变性(去折叠)和复性(再折叠)的直观结果。与所有MP应用一样,测量过程只需极少量样品,就可以方便地测试各种变性条件。为了举例说明MP在非折叠/复性实验中的优势和局限性,我们对烯醇化酶进行了研究,这是一种已知可进行可逆变性的蛋白质。
491 人阅读发布时间:2024-04-29 19:41